基于不同种属细胞体外血脑屏障模型的药物渗透性比较

拓文静, 华若辰, 李星玥, 宋继红, 卢闻

2023, 32(4): 237-249. DOI: 10.5246/jcps.2023.04.021

摘要 ( 196 )

HTML ( 19)

PDF (2119KB) ( 58 )

数据和表 | 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

血脑屏障(BBB)对维持中枢神经系统(CNS)内环境稳态发挥着重要作用。由于BBB的存在, 许多CNS药物难以进入脑组织发挥药效, 严重影响CNS疾病的治疗。基于细胞的体外BBB模型是研究CNS药物递送的重要工具。现已开发利用小鼠、大鼠、牛、猪和人的脑内皮细胞用于建立体外BBB模型。然而, 由于物种的差异, 不同种属来源的体外BBB模型在转运体、受体和紧密连接等蛋白表达上的差异是显著的。本文综述了常用的几种不同种属的体外细胞BBB模型, 为研究者选择BBB模型提供参考。

过表达的人β防御素-3可抑制结肠癌细胞增殖、迁移和细胞周期

赵炎葱, 龚慧媛, 李景华

2023, 32(4): 250-259. DOI: 10.5246/jcps.2023.04.022

摘要 ( 152 )

HTML ( 15)

PDF (5837KB) ( 80 )

数据和表 | 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

本文研究探讨了人β防御素-3(hBD3)对结肠癌HCT116细胞的增殖、迁移和细胞周期的影响。将真核表达载体(pcDNA3.1-hBD3)转染于人结肠癌HCT116细胞。采用qPCR和Western blot方法检测转染效率。使用Western blot方法检测细胞中β-catenin, E-cadherin, N-cadherin蛋白的分子表达水平; 采用单通道Hoechst染色检测细胞核数量和增殖能力; 流式细胞仪检测细胞周期; 划痕法和Transwell法检测结肠癌HCT116细胞的迁移能力。结果显示, 转染过真核表达载体(pcDNA3.1-hBD3)的结肠癌HCT116细胞, hBD3的mRNA表达和蛋白表达水平显著高于结肠癌HCT116和转染pCMV-Blank的HCT116细胞; 其增殖能力和迁移侵袭能力均受到不同程度的抑制; 细胞周期的G2/M期受到阻滞; HCT116-hBD3细胞中β-catenin和N-cadherin两种蛋白的表达水平均低于HCT116和HCT116-Blank细胞, 而E-cadherin蛋白表达的水平均高于HCT116和HCT116-Blank细胞。本文发现, hBD3或许是通过调控Wnt/β-catenin信号通路来调控结肠癌细胞HCT116的增殖、迁移和细胞周期。

乙酰胆碱通过调节IL-1β/IL-1RA平衡改善炎症微环境的机制探讨

马宁, 纪超

2023, 32(4): 260-267. DOI: 10.5246/jcps.2023.04.023

摘要 ( 181 )

HTML ( 11)

PDF (2447KB) ( 25 )

数据和表 | 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

本研究旨在探讨乙酰胆碱的抗炎机制, 为阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)炎性病理机制的验证和治疗药物的筛选提供进一步依据。研究首先建立Aβ_25?35诱导小胶质细胞系BV-2细胞炎性损伤的体外模型, 观察氯化乙酰胆碱(ACh)抑制炎症反应的作用。于有或无α7 nAChR的阻断剂(α-银环蛇毒)存在的情况下, 采用ELISA方法评价ACh作用后IL-1β和IL-1RA的表达及二者比率, 并分别利用Western blot和EMSA方法测定MAPK(JNK, p38和ERK)及NF-κB通路相关分子的表达及磷酸化水平。结果显示, ACh能够显著降低IL-1β/IL-1RA比率, 对抗Aβ_25?35诱导的IL-1系统炎症活性变化, 维持IL-1亚家族平衡。预先给予α7 nAChR阻断剂能够阻断ACh对IL-1β和IL-1RA蛋白表达的抑制作用。同时, α7 nAChR阻断剂能够阻断ACh对下游ERK1/2 MAPK蛋白的磷酸化水平和NF-κB的活化的调节作用。总之, 乙酰胆碱能够抑制Aβ诱导的BV-2细胞中IL-1亚家族的炎症活性、维持该亚家族的平衡稳定, 该作用由α7 nAChR介导, 有ERK1/2 MAPK和NF-κB通路的参与。该研究为发现探索AD发病的关键机制提供依据, 同时也为寻找AD治疗的新靶点提供参考。

基于网络药理学的蒙药肋柱花抗急性肝损伤作用机制研究

敖民, 包明兰, 侯亚星, 月英, 李慧芳, 吴国华, 苏日嘎拉图

2023, 32(4): 268-282. DOI: 10.5246/jcps.2023.04.024

摘要 ( 151 )

HTML ( 13)

PDF (6253KB) ( 23 )

数据和表 | 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

本文通过网络药理学和生物信息学研究蒙药肋柱花抗急性肝损伤作用机制, 为进一步研究肋柱花治疗急性肝损伤等代谢性疾病提供参考。应用肋柱花抗D-GLa诱导的急性肝损伤模型大鼠, 分析血清转氨酶和酶联免疫吸附法变化。采用TCMSP数据库及文献检索收集肋柱花化学成分及其对应的靶点, 应用GeneCards和DisGeNET疾病数据库获取急性肝损伤(ALI)靶点, 将肋柱花活性成分靶点与ALI靶点交集, 所得到的靶点为肋柱花抗急性肝损伤ALI的靶点。利用Metascape数据库对共有靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析, 使用Cytoscape软件构建相关网络图, 筛选主要核心成分及关键靶点进行分子对接验证。并用蛋白免疫印迹法(Western Blot)进一步检测大鼠肝脏中转录激活因子3(STAT3)、AKT1、CASP3的表达情况。血清转氨酶和酶联免疫结果显示肋柱花对D-GLaN诱导的大鼠肝损伤有不同程度的保护作用和抗炎作用。网络药理学筛选共得到肋柱花的10个活性成分及289个对应的靶点, 急性肝损伤靶点843个, 二者共同靶点89个, GO富集和KEGG Pathway分析发现共同靶点主要为癌症通路、PI3K-Akt信号通路、Ras信号通路、HIF-1信号通路、TNF-α信号通路、Toll样受体信号通路、MAPK信号通路、VEGF信号通路、p53信号通路、NF-κB信号通路等。分子对接结果显示, 獐牙菜苦苷、木犀草素、山奈酚等核心成分能与EGFR、SRC、AKT1、STAT3、CASP3等靶点良好对接。蛋白免疫印迹结果显示, 与正常对照组对比, 模型组大鼠肝组织中的AKT1、STAT3和CASP3蛋白表达明显增加, 具有统计学意义(P < 0.05)。与模型组对比, 阳性组和肋柱花低、中、高剂量组肝组织中的AKT1、STAT3蛋白表达降低, 具有统计学意义(P < 0.05)。与模型组对比, 肋柱花中、高剂量组肝组织中的CASP3蛋白表达明显降低, 肋柱花低剂量组肝组织中CASP3蛋白表达未见明显差异(P > 0.05)。肋柱花是潜在治疗ALI的蒙药, 通过多靶点、多途径干涉ALI的进展, 其发挥治疗作用的机制可能与干预(STAT3)、AKT1、CASP3等靶点蛋白的表达及调控癌症信号通路、PI3K-Akt信号通路、TNF-α等信号通路进而抑制急性肝损伤和炎症反应有关。

云南美登木愈伤组织化学成分的研究

蒋蕾, 涂渝娇, 代伟华, 袁琳

2023, 32(4): 283-290. DOI: 10.5246/jcps.2023.04.025

摘要 ( 148 )

HTML ( 5)

PDF (1633KB) ( 13 )

数据和表 | 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

采用RP-18中压柱、硅胶柱和Sephadex LH-20柱等色谱技术对云南美登木愈伤组织的干燥细胞和新鲜细胞提取物的乙酸乙酯部分进行分离纯化得到16个化合物。通过核磁共振和质谱等波谱技术鉴定化学结构为雷公藤内酯甲 (1), 雷公藤内酯乙 (2), 3β,22α-二羟基齐墩果-12-烯-29-酸 (3), 22α-羟基-3-氧-齐墩果-12-烯-29-酸 (4), 3-表卡通酸 (5), 齐墩果-9(11),12-二烯-3-β-醇 (6), 22α-羟基-3-氧-乌苏-12-烯-30-酸 (7), 雷公藤三萜酸C (8), 2α,3β-二羟基-木栓烷-29-酸 (9), 美登酮酸 (10), 3β-羟基豆甾-5-烯-7-酮 (11), 7β-羟基谷甾醇 (12), 豆甾-4-烯-3-酮 (13), β-谷甾醇 (14), 1-β-D-glucpotyransyl-2,6-dimetoxi-4-propenyl-benzen (15)和腺苷 (16)。除化合物10和14外, 其余化合物均为首次从云南美登木植物细胞及其植株中分离得到。

恶性胸膜间皮瘤免疫检查点抑制剂疗效及安全性meta分析

吴崇昊, 黄攀杰, 杨春琦, 高川, 曾鸣

2023, 32(4): 291-301. DOI: 10.5246/jcps.2023.04.026

摘要 ( 124 )

HTML ( 12)

PDF (4074KB) ( 24 )

数据和表 | 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

本研究旨在评价免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors, ICIs)治疗在恶性胸膜间皮瘤(malignant pleural mesothelioma, MPM)中的疗效和安全性。计算机检索PubMed、Embase、The Cochrane Library、Web of science等数据库, 建库起至2022年10月, 检索ICIs治疗MPM的前瞻性临床研究。按照纳入与排除标准独立筛选文献、提取资料并评价偏倚风险后, 采用Stata17.0软件进行统计分析。结果发现, 共纳入8个单臂研究, 3个随机对照试验, 包括839例患者。Meta分析结果显示, 接受了ICIs治疗的研究合并ORR为37% (95% CI, 23–51), 中位OS为14.02个月 (95% CI, 11.40–17.64), 中位PFS为4.72个月 (95% CI, 3.62–6.16)。根据治疗方法的类型: ICI单药治疗或ICI联合治疗(联合双药ICI/ICI联合化疗)进行亚组分析。结果为ORR 51% (95% CI, 39–62) vs 19% (95% CI, 8–29); OS 18.30个月 (95% CI, 16.42–20.40) vs 11.03个月 (95% CI, 9.46–12.86); PFS 6.78个月 (95% CI, 6.18–7.44) vs 3.40个月(95% CI, 2.41–4.79); 提示ICI联合治疗在ORR、OS、PFS上明显优于ICI单药治疗。所有研究中3–4级AEs发生率为30%, ICIs治疗最常见不良事件为乏力、腹泻、及皮疹。其中联合用药的3–4级AEs高于单药组(35% vs 22%)。因此, ICI联合治疗在MPM患者中有临床应用价值, 支持在MPM患者中大规模临床应用。ICI联合治疗在安全性方面较一线化疗方案3–4级不良反应事件发生率更高。

健肾颗粒对5/6肾切除大鼠的初步药效学研究

邱海莹, 张梦迪, 贾海燕, 周梦露, 卢洪杰, 吴燕

2023, 32(4): 302-316. DOI: 10.5246/jcps.2023.04.027

摘要 ( 123 )

HTML ( 5)

PDF (3032KB) ( 30 )

数据和表 | 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

慢性肾功能衰竭(CRF)是一个世界性的公共卫生问题。目前，可供选择的治疗方法有限。健肾颗粒在空军特色中心临床应用多年，疗效显著。本文探讨健肾颗粒对慢性肾衰大鼠(chronic renal failure, CRF)的治疗作用。建立5/6肾切除慢性肾衰大鼠模型, 尿毒清为阳性对照。尿毒清组给予3.12 mg/g/d混悬液灌胃, 健肾颗粒低、中、高剂量组分别给予0.96、1.92、3.84 mg/g/d混悬液灌胃, 模型组给予等体积的生理盐水, 共给药8周。治疗期间, 观察大鼠的行为状态、体质量变化; 测定各组大鼠血清肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白含量; 光镜下观察肾组织病理变化; 蛋白免疫迹法、qRT-PCR检测肾组织中TGF-β1表达量。建立过氧化氢(H₂O₂)诱导的人类肾小管上皮细胞(Human kidney cells, HKC)氧化损伤细胞模型, 给予健肾颗粒, 试剂盒法检测细胞存活率, 流式细胞术检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential, MMP)、活性氧(reactive oxygen species, ROS)和Ca²⁺水平，蛋白免疫迹法、RT-PCR检测细胞TGF-β1表达量。健肾颗粒能降低CRF大鼠血清肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白。肾组织病理学检查显示健肾颗粒对肾损伤有改善作用。健肾颗粒可显著降低CRF大鼠TGF-β1 (P < 0.05)水平。给予健肾颗粒处理后, HKC细胞活力和MMP水平升高, ROS和Ca²⁺水平明显降低。TGF-β1表达量下降。健肾颗粒对CRF大鼠肾功能具有保护作用, 可缓解肾衰症状。

中国仿制药替代影响因素分析——基于"4 + 7"带量采购精神科用药患者角度

刘文夏, 马俊, 杨照, 江滨

2023, 32(4): 317-321. DOI: 10.5246/jcps.2023.04.028

摘要 ( 128 )

HTML ( 8)

PDF (1515KB) ( 39 )

数据和表 | 参考文献 | 相关文章 | 计量指标

中国仿制药替代受到多种因素的影响, 然而现有的研究主要集中在政策分析和临床使用上。本文旨在从"4 + 7"带量采购精神科用药患者角度, 研究中国仿制药替代的影响因素。以问卷调研四个试点城市精神科患者的人口特征、使用中选仿制药意愿及影响因素等, 并对其进行统计分析。研究发现, 单因素影响分析中, 使用中选仿制药意愿与患者教育水平、年龄、平均月收入、患病时间、患病程度显著相关; 影响因素回归分析中, 使用中选仿制药意愿与患者年龄显著相关。因此, 政府应当重视中青年群体在仿制药替代中的作用, 进行差异化管理, 加强对各方人士的教育宣传, 调整中选仿制药的医保支付标准, 要求医生对目标患者提出使用中选仿制药建议。

夏青团队发表工程化"“tRNA—酶" 正交系统治疗罕见病的实验方案

北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室

2023, 32(4): 322-324.

摘要 ( 87 )

PDF (1752KB) ( 11 )

相关文章 | 计量指标

2023年3月17日, 夏青团队受邀在Cell子刊STAR Protocols杂志在线发表了题为"Adeno-associated viral delivery of engineered tRNA-enzyme pairs into nonsense mutation mouse models"的实验方案文章(Protocol)。该文章提出了利用工程化“tRNA—酶” 正交系统来通读无义突变的位点, 通过引入一个非天然氨基酸(UAA)来恢复致病蛋白表达的新型治疗策略。文章详细介绍了如何筛选和优化tRNA-酶正交对以实现有效的 UAA引入, 利用腺相关病毒(AAV)载体进行腹腔和肌肉注射的两种递送方式, 详细评价了治疗效果。该工作突破了以往只能局限于使用基因治疗和基因编辑逐一进行每个基因的药物研发模式, 为今后开创通用型点突变罕见病治疗提供有效工具。

马明团队在多环倍半萜形成机制和结构多样性扩展方面取得新进展

北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室

2023, 32(4): 325-327.

摘要 ( 83 )

PDF (2019KB) ( 6 )

相关文章 | 计量指标

2023年4月5日, 北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室马明团队在JACS上发表了题为"Structural Insights into Three Sesquiterpene Synthases for the Biosynthesis of Tricyclic Sesquiterpenes and Chemical Space Expansion by Structure-Based Mutagenesis"的研究论文。该研究阐明了三种三环倍半萜环化酶的晶体结构和催化机制, 并通过环化酶的理性改造扩展倍半萜结构多样性。

史录文/管晓东团队在抗菌药物合理使用领域取得研究进展

北京大学药学院

2023, 32(4): 328-330.

摘要 ( 80 )

PDF (2242KB) ( 8 )

相关文章 | 计量指标

近日, 北京大学药学院药事管理与临床药学系史录文教授/管晓东副教授团队与北京大学第一医院郑波教授联合在公共卫生权威期刊Bulletin of the World Health Organization在线发表了题为"Inpatient antibacterial use trends and patterns in China’s hospitals, 2013–2021"的最新研究成果。

史录文/管晓东团队在儿童肿瘤基本药物临床获益分析中取得研究进展

北京大学药学院

2023, 32(4): 331-332.

摘要 ( 82 )

PDF (1777KB) ( 9 )

相关文章 | 计量指标

近日, 北京大学药学院药事管理与临床药学系史录文教授/管晓东副教授团队在医学权威期刊柳叶刀·发现科学系列eClinicalMedicine在线发表了题为"Evidence of clinical benefit of WHO essential anticancer medicines for children, 2011–2021" 的最新研究成果。

当期目录